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检测前 水样预处置惩罚相关
1.含有余氯水样在举行大肠菌群指标检测前是否需要举行预处置惩罚？
答：需要。
余氯包括游离性余氯和化合性余氯。游离性余氯（HClO、ClO?、Cl?）与化合性余氯（NH?Cl、NHCl?）能快速破损细菌的细胞壁、细胞膜，氧化细菌内部的酶和遗传物质，导致细菌殒命。若是对含余氯水样不举行预处置惩罚，水样中的大肠菌群可能部分被杀灭、导致检测效果偏低。
表1 余氯预处置惩罚相关标准
针对含余氯水样，可选用威廉希尔官网地址无菌取水袋或无菌取样瓶，两类产品均凭证 GB/T 5750.2-2023《生涯饮用水标准磨练要领 第 2 部分：水样的收罗与生涯》的相关要求添加硫代硫酸钠，可有用去除水样中的余氯。若使用威廉希尔官网地址未添加硫代硫酸钠的无菌取水袋、无菌取样瓶，建议对含余氯水样先行预处置惩罚。
2.重金属离子含量高的水样为什么要举行预处置惩罚？
重金属离子会改变酶底物试剂系统的离子强度与pH值，直接抑制目的微生物体内酶的活性，导致其无法与酶底物充分反应。部分重金属离子与显色剂或反应产品团结，爆发沉淀影响判读，造成检测效果偏低。
凭证HJ 1001-2018《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》与HJ 347.2-2018《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》划定：若是收罗的是重金属离子含量高的水样，应在每100mL水样中添加0.036g乙二胺四乙酸二钠。
小贴士
情形水样中北方地区干旱降雨少，且普遍漫衍石灰岩、白云岩、富钙黄土等，矿物质易被水消融，导致水样中重金属离子含量偏高。南方地区湿润多雨，且主要漫衍火成岩（花岗岩等）、变质岩等，矿物质不易消融，水体重金属离子含量偏低。
地下水因漫长渗透历程，能够充分消融地层（如石灰岩、石膏）中的金属离子，地下水的重金属含量普遍高于地表水。
威廉希尔官网地址酶底物法大肠菌群检测试剂复配多种因素，能够缓冲重金属离子的攻击，各组分与重金属离子不会发心理化反应。经质控菌株与水样检考试证，使用威廉希尔官网地址的耗材与酶底物法大肠菌群检测试剂，不需对重金属离子含量高的水样特殊举行预处置惩罚。
检测中 实验历程与作育相关
1.酶底物法大肠菌群检测泛起浅色孔的缘故原由、处置惩罚要领与检测效果判读？
答：酶底物法大肠菌群检测泛起浅色孔的缘故原由有：
1）水体中的部分大肠菌群自身生长慢、产酶少。
2）情形压力造成部分大肠菌群菌体处于损伤状态。
凭证GB/T 5750.12-2023 《生涯饮用水标准磨练要领 第12部分：微生物指标》总大肠菌群检测酶底物规则定：若是效果为可疑阳性，可延伸作育时间到28h举行效果判读。
作育时间小于 24h泛起的阳性效果视作有用，作育时间高于28h的阴性效果也视为有用。
24-28h内泛起的效果转变以 28h最终效果为有用效果，28h后泛起的效果转变均视为无效。
2. 酶底物法大肠菌群检测泛起可疑阳性孔、为什么可以延伸作育时间至28h视察效果？
答：延伸作育时间至28h，是对24h可疑阳性效果的增补确认。若是24h已泛起明确阳性，则不需延伸作育。只有保存难以识别的可疑阳性效果，需延伸作育时间至28h。
对大肠菌群：28h是一个经由验证的、能充分增进绝大大都受到情形压力而菌体损伤的大肠菌群恢复的窗口期。
关于非大肠菌群：28h是一个清静界线，可以确保抑菌因素的有用性，最大限度地避免非大肠菌群的生长，从而包管要领的高特异性。
3. 为什么粪大肠菌群检测时，定量盘中会泛起渐变黄色？
答：由于作育箱加热方法、定量盘摆放与堆叠方法造成定量盘受热不均，影响粪大肠菌群的生长。
定量盘摆放与堆叠方法造成箱体内热转达更慢，热漫衍更不匀称。粪大肠菌群作为温度敏感型细菌，在温度低的一侧生长产酶变色，在温度高的一侧（如凌驾了44.5 ± 0.5℃的上限），生长被抑制，泛起如下图所示的渐变色。
当定量盘泛起渐变黄色，应连忙依据GB/T 10592-2023 《崎岖温试验箱手艺条件》与GB/T 28851-2012 《生化作育箱手艺条件》相关标准举行作育箱温度验证。凭证验证效果，接纳JJF 1101-2019 《情形试验装备温度、湿度参数校准规范》与《作育箱使用说明书》举行温度调理。包管作育温度切合检测条件。
建议粪大肠菌群检测时，使用隔水式作育箱，按期举行温度验证，将定量盘置于作育箱中央，且定量盘堆叠不凌驾5个，每叠定量盘之间至少距离5cm。
检测后 放弃物处置惩罚相关
1. 酶底物法微生物检测作育后的定量盘如那里置？
答：作育后的定量盘经121℃、高压蒸汽灭菌20min后，作为一样平常放弃物处置惩罚。
1）作育后的定量盘置于专用的放弃物容器内，集中存放在指定所在。
2）作育后的定量盘每20个放入双层生物清静灭菌袋中，袋口打结。
3）放入灭菌锅经121℃、高压蒸汽灭菌20min处置惩罚后，作为一样平常放弃物处置惩罚。
集中存放→双层生物清静灭菌袋→121°C、高压蒸汽灭菌20min
依据GB 19489-2008 《实验室生物清静通用要求》；SN/T 4835-2017 《实验室生物放弃物管理要求》；HJ 1001-2018 《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》相关划定。